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眼见为实:视频原子力显微镜显示实时CRISPR基因编辑
点击次数:3799 公布日期:2018-1-9  来源:www.qd-china.com
    自2012年以来,研究人员常用一种叫做CRISPR的强大“基因组编辑”技术对生物的DNA序列进行修剪、切断、替换或添加。CRISPR来自微生物的免疫系统,这种工程编辑系统使用一种酶,能把一段作为引导工具的小RNA切入DNA,就能在此处切断或做别的改变。
    CRISPR已经成为生命科学领域最受关切的基因编辑技术,其效果得到大家一致认可。虽然科学家可通过RT-PCR、WB等方法间接证明CRISPR的功能,但仍未有直接的证据来证实。究其原因:一是生物分子间的相互作用速率快,需要高速的成像手段才能捕获到;二是生物分子比较小,通常为纳米级,一般显微镜由于受光学衍射极限所限不克分辨。最近,姚记娱乐城送彩金Kanazawa University的科学家使用 视频原子力显微镜HS-AFM 胜利观察到了实时CRISPR基因编辑,为CRISPR技术的有效性提供了直接的证据。
 
HS-AFM视频结果直观显示构象差异:
 
 
    HS-AFM视频结果显示apo-Cas9为柔性构象(flexible conformations),而Cas9–RNA则为稳定的双叶型构象(stable bilobed architecture)。 
 
Cas9-RNA介导的PAM依赖性DNA识别
 
 
Cas9-RNA靶向定位到目的DNA,形成Cas9–RNA–DNA复合体。
 
Cas9-RNA对目的DNA进行剪切 
 
 
在Mg2+存在的条件下,Cas9-RNA对目的DNA进行特异性剪切。
 
    原文连接:https://www.nature.com/articles/s41467-017-01466-8
 
    这项工作的完成主要借助了姚记娱乐城送彩金RIBM公司研发的超高速视频原子力显微镜HS-AFM,HS-AFM突破了传统原子力显微镜“扫描成像速慢”的限制,能够实现在液体情况下超快速动态成像,分辨率为纳米水平。待测样品无需特别固定,不影响生物分子的活性,特别适用于生物大分子互作动态观察。推出至今,环球已有80多位用户,公布SCI论文200余篇,其中包括Science, Nature, Cell 等顶级杂志。 
 
新品推举——HS-AFM来到

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来源:Quantum量子科学仪器贸易(北京)有限公司
联系电话:010-85120280
E-mail:info@qd-china.com

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